Capire l’embriologia – cosa succede nel laboratorio di embriologia?

Il time-lapse non ha un’effettiva rilevanza nello sviluppo dell’embrione ,si tratta dell’evoluzione di uno strumento grazie al quale è possibile non disturbare l’embrione durante il suo sviluppo, esistono ad oggi centri con efficienza altissima che non si avvalgono di questo strumento dato che non ha rilevanza in merito alla capacità di ottenere il nostro risultato ; è invece importante dal punto di vista della ricerca perché permette di monitorare lo sviluppo dell’embrione.

In questi casi sarebbe utile conoscere tutta la storia della coppia e della paziente per fornire una risposta più precisa, diciamo che se ci basiamo solo sull’aspetto statistico, possiamo dire che un evento come quello dell’aborto è abbastanza probabile in natura e se tale avvenimento si è verificato una sola volta non è indicativo al riguardo. Avendo comunque un evento simile alle spalle, consiglierei, se possibile, di effettuare la diagnosi genetica preimpianto per poter così conoscere a priori la situazione e non andare incontro ad un ulteriore insuccesso evitando un nuovo trauma psicologico non indifferente per la donna. Statisticamente in ogni caso teniamo presente che tale evento può verificarsi nuovamente e può coinvolgere anche donne che concepiscono naturalmente, l’equipe di riferimento che segue la coppia, potrà consigliare di svolgere questa ulteriore indagine se lo riterrà necessario poiché è comunque necessario valutare diversi aspetti relativi alla coppia.

Il tipo di blastocisti non è in grado di fornirci alcun tipo di informazione sul suo aspetto cromosomico, soltanto tramite la diagnosi genetica preimpianto e la PGT (test genetico preimpianto) possiamo recuperare informazioni di questo tipo.

Immagino che la paziente faccia riferimento alle analisi effettuate in merito alla PGT, queste dipendono dalla storia della coppia e dal motivo per cui si devono essere effettuate, è importante sapere se vi si ricorre perché si sono verificati aborti o se, ad esempio, sono già state fatte analisi genetiche sulla coppia e si è a conoscenza della possibilità di incorrere in patologie genetiche specifiche. Si può valutare la presenza di patologie monogeniche, quindi legate ad un singolo gene oppure si può valutare la presenza di eventuali anomalie cromosomiche quindi di un diverso numero di cromosomi rispetto a quello che normalmente sarebbe corretto, ovviamente ogni storia è a se e deve essere valutata attentamente e in maniera specifica per effettuare le indagini più appropriate.

L’incubatore è realizzato in modo tale da rispecchiare esattamente le caratteristiche necessarie alla crescita dell’embrione e si è visto e dimostrato scientificamente che non va ad alterarne lo sviluppo, non può generarsi alcun tipo di problema come ad esempio eventuali infezioni, rispecchia al 100% l’ambiente all’interno dell’apparato riproduttore femminile e proprio per questo motivo funziona correttamente e fa si che l’embrione si sviluppi.

Ad oggi, grazie all’evoluzione della tecnica no, vengono effettuati giornalmente milioni di test genetici preimpianto e l’embrione non subisce alcun tipo di alterazione o compromissione nella stragrande maggioranza dei casi.

Questo aspetto rientra nelle mansioni del biologo, si devono rispettare determinati canoni e linee guida predisposti dal ministero della sanità ed ogni centro di PMA è costantemente sottoposto a controlli poiché è annoverato nelle liste delle banche di organi essendo embrioni e ovociti considerati a tutti gli effetti come questi ultimi in quanto parti del corpo umano. È necessario mantenere l’ambiente pulito e controllato e per questo i vari laboratori sono dotati di allarmi e spie che si attivano al verificarsi di ogni minima variazione riducendo al minimo la probabilità che si possa incorrere in anomalie di sorta poiché queste ultime verrebbero controllate e segnalate in modo tale da poter intervenire e porvi rimedio.

In Italia così come in Europa, la figura dell’embriologo clinico è abbastanza combattuta a livello di riconoscimento poiché all’interno dei laboratori si possono trovare diverse figure preposte a questo ruolo essendo richieste, per svolgerlo conoscenze di biologia di base ,una specializzazione e qualunque tipo di master può indirizzare verso questa professione, ultimamente la SIERR (Società italiana di Embriologia, Riproduzione e Ricerca) sta lavorando molto in tal senso cercando di proporre scuole di specializzazione per l’ingresso dell’embriologo clinico anche negli ospedali come figura riconosciuta; in tutta Europa ad oggi l’unico riconoscimento ufficiale è quello della ESHRE che effettua ogni anno, nell’ambito del congresso europeo, un esame che è ciò che maggiormente si avvicina al riconoscimento di embriologo clinico, al di là di questo potremmo riassumere che ciò che maggiormente conta ad oggi per poter essere riconosciuti in questa figura è l’esperienza, più anni di pratica si fanno più embriologici clinici si è.

Come in ogni mestiere deve essere preparato sul campo sia a livello pratico che teorico, deve avere una preparazione scientifica di base, deve mantenersi sempre aggiornato e possedere un continuo interesse nella materia con il desiderio di leggere tutto ciò che riguarda la letteratura scientifica, conoscere le nuove scoperte nel suo campo specifico e non solo e, non meno importante, la predisposizione al lavoro di squadra poiché un embriologo clinico lavora in ambienti di laboratorio relativamente piccoli ed è quindi a stretto contatto costante con i colleghi con i quali, come in ogni lavoro, è importante riuscire a lavorare nelle migliori condizioni.

La procedura di posizionamento, prevede che durante il transfer si inserisca il catetere e venga poi rilasciato l’embrione, questo procedimento viene svolto ecograficamente ma possono essere milioni le variabili che entrano in gioco e per le quali l’embrione non si va ad impiantare esattamente nel punto in cui viene rilasciato, può dipendere dalla natura dell’endometrio, talvolta dalla velocità con cui viene inserito, tendenzialmente è un evento che non si verifica o accade con molta difficoltà; il fatto che la blastocisti di cui parliamo sia crioconservata non influisce in alcun modo.

Ad oggi fortunatamente le tecniche sono fortemente migliorate ed evolute tanto da garantire il 99% della sopravvivenza dopo crioconservazione sia che si parli di embrioni che di ovociti quindi il livello di efficienza è molto alto. Da un punto di vista microscopico può accadere che la blastocisti subisca dei piccoli movimenti, ma una volta posta nel terreno di coltura successivamente alla scongelazione, ritrova il suo equilibrio e si resetta. In linea generale non esiste una differenza statistica tra il congelato ed il fresco tanto è vero che dopo diagnosi preimpianto si congela e si scongela nuovamente, oggi possiamo dire di essere arrivati ad un punto in cui la crioconservazione è una tecnica di routine e non inficia in alcun modo il risultato finale ,questo vale anche per gli ovociti che sono ovviamente cellule estremamente più delicate della blastocisti e vengono per tanto trattate in modo appropriato, con maggior cura e delicatezza perché si tratta di materiale più delicato, anche qui comunque il tasso di sopravvivenza successivo alla crioconservazione è alto e non crea estrema preoccupazione nell’embriologo clinico che lavora in laboratorio.

La procedura ICSI deve essere svolta da un biologo che abbia un training molto lungo e sia in grado di effettuarla in maniera corretta ,è importante che il personale sia riconosciuto e qualificato; oltre a questo si possono applicare tutta una serie di piccole accortezze che appartengono ai protocollo e alla routine che appartengono a tutti i laboratori come ad esempio posizionare l’ovocita in un determinato modo per effettuare l’inserimento dello spermatozoo, ma non si può fare niente al di fuori di questo ,se la qualità dell’ovocita è buona, lo spermatozoo è buono e la ICSI viene effettuata da personale qualificato la percentuale di successo sarà sicuramente alta

La tecnica di crioconservazione cristallizza una determinata situazione quindi ciò che avevamo prima di iniziare questo processo corrisponde a ciò che avremo a processo terminato, pensare per tanto che lo stato della blastocisti possa migliorare è un po’ difficile. D’altro canto se una blastocisti parzialmente degenerata viene congelata significa che si ritiene abbia comunque una possibilità di successo altrimenti non si procederebbe a crioconservare qualcosa che già si sa avrà un esito fallimentare; i motivi per cui può essere degenerata possono essere molteplici e purtroppo non si possono sapere, possono essere fattori genetici così come fattori di qualsiasi altra natura ciò che è bene comprendere è che il processo di crioconservazione non va ad intaccare il risultato finale.

Dopo il pick-up ,il biologo inizia ad osservare al microscopio tutti gli ovociti e tra questi seleziona solo quelli maturi che sono tendenzialmente tutti in grado di garantire un concepimento ( questa è la caratteristica a priori più importante); il momento in cui si potrà effettivamente valutare se gli ovociti sono in grado di dare origine ad un embrione evolutivo è successivo alla fecondazione grazie alla valutazione del corretto susseguirsi tutti gli stadi richiesti, quindi quello di zigote poi la divisione in varie cellule la morula e la blastocisti.

Si, assolutamente, esistono diversi procedure che permettono di farlo, ma in generale sia che ci si sottoponga a IUI o ad ICSI o ad una FIVET, il campione di seme viene “potenziato” e in taluni casi si applicano protocolli per migliorarlo, si va dallo swim-up (tecnica per la separazione degli spermatozoi motili) al gradiente fino all’aggiunta di sostanze che permettono di renderlo più reattivo alla fecondazione.

Purtroppo non possiamo saperlo con esattezza, tendenzialmente si tratta di caratteristiche genetiche, parliamo di cellule che hanno dei difetti genetici e quindi l’embrione, naturalmente, in qualche modo si rende conto che non può proseguire nel suo processo di sviluppo, il perché potremmo dire sia di natura puramente biologica e non c’è niente purtroppo che possiamo fare per migliorare gli embrioni a priori.

L’embryoscope, non migliora in alcun modo il destino dell’embrione, questo una volta fecondato, sia che sia riposto in un incubatore normale che in un embryoscope, non muta il suo destino, l’unica differenza sta nel fatto che monitorandolo giornalmente senza stressarlo avremo una visione generale dell’embrione, l’embryoscope, potremmo riassumere, è un arricchimento di informazioni utili per l’embriologo per poter valutare lo stato dell’embrione, non esiste però alcuna differenza in merito alle probabilità di attecchimento o di sviluppo di quest’ultimo in funzione del tipo di incubatore all’interno del quale viene riposto.

Gli ovociti sono cellule di dimensioni molto piccole, visibili al microscopio e la loro grandezza è costante prima e dopo il congelamento, proprio perché quest’ultimo ne garantisce la natura senza provocarne variazioni, esistono casi in cui ci troviamo di fronte ad ovociti non normali, che sono estremamente più grandi degli altri ma non si susano ai fini della fecondazione perché potrebbe trattarsi di materiale compromesso stante la non corrispondenza con ciò che dovrebbe essere in natura. Il congelamento quindi non inficia ne’ le dimensioni ne’ la natura degli ovociti.

Con il termine PGT ci riferiamo alla diagnosi genetica preimpianto che si svolge quando viene raggiunto, dopo circa cinque/ sei giorni, lo stadio di blastocisti, quest’ultima è formata da una piccola massa interna che darà poi vita all’embrione ed una massa esterna, che potremmo descrivere come il perimetro, che darà invece origine agli annessi embrionali che. A loro volta, daranno origine alla gravidanza; quello che viene fatto è un prelievo di alcune cellule della parte esterna (senza compromette in alcun modo la parte centrale dell’embrione )avvalendosi di un particolare ago, queste vengono poi inserite in una provetta e mandate al laboratorio di genetica; la blastocisti verrà congelata in attesa del referto e quando quest’ultimo darà esito positivo o negativo a seconda del caso, la blastocisti verrà scongelata e si procederà con il transfer.

Si tratta di materiale inutilizzabile poiché non ha generato niente e conseguentemente viene trattato come rifiuto biologico ed eliminato perché degenererebbe comunque in maniera autonoma per un processo naturale.

Il numero dei soggetti che lavorano all’interno del laboratorio dipende dalla grandezza di quest’ultimo, dalle dimensioni della clinica, dal numero di pazienti seguiti, statisticamente si parla di un numero compreso tra 5 e 10 embriologi nei centri medio grandi ( oltre in taluni casi alla presenza di tirocinanti); in merito alle funzioni, queste dipendono dalla politica applicata dalla struttura, in alcune è richiesto a tutti gli embriologi di svolgere tutte le funzioni in altre, al contrario, che ognuno svolga una singola funzione occupandosi ad esempio di andrologia o di ICSI o di PGT.